DNAすいすい-E 株式会社リーゾ

★カラムを使わない簡易な抽出法
★火山灰土壌、腐葉土、活性汚泥等様々な材料に対応
★低コスト（100〜200円/サンプル）
★スピーディー（５ステップ）
★常温で試料保存も可能！

■プロトコール
（１）バッファーとサンプル（土壌100μl相当、汚泥500μl）を混合、必要に応じて破砕
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（２）遠心して上清を回収
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（３）フェノクロ添加・混合
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（４）遠心分離
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（５）上清をイソプロパノール沈殿
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（６）70％エタノールでリンス
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　　　　　　 DNA！

■使用例　　土壌・活性汚泥からのDNA抽出

　１．人工水田土壌（火山灰を多く含む）
　２．畑土壌（腐葉土を多く含む家庭菜園の土）
　３．活性汚泥Ａ（たれ・からし工場排水処理用）
　４．活性汚泥Ｂ（給食施設排水処理用
よりDNA抽出を行い、3分の1量を電気泳動しました。


次に、抽出されたＤＮＡを鋳型としてPCRを行いました。プライマーはバクテリア16SrRNA遺伝子設計したもの（増幅断長723bp）を用いました。
鋳型として抽出したDNAの250倍希釈液１μlを使用しました。

　マーカー：100,200,300,500bp
火山灰を多く含む土壌、腐葉土を多く含む土壌、2種類の活性汚泥から抽出したDNAはすべてPCRの鋳型として機能する（酵素反応阻害物質を含まない）ことが確認できました。